一、應(yīng)用概述

對可重復(fù)使用的Teledyne ISCO RediSep Silver反相C18和RediSep Gold^®高性能C18、C18Aq及C8色譜柱進行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理、清洗和儲存，有助于延長柱子壽命并提高其一致性和可靠性。

二、通用方法

初始預(yù)處理

在使用前，用六倍柱體積（CV）的1:1水：乙腈沖洗柱子。或者，通過柱子泵入兩倍柱體積的100%乙腈，然后蓋上蓋子存放一小時后再使用。有關(guān)柱體積數(shù)據(jù)，請參見表1。

表1：色譜柱數(shù)據(jù)

樣品負載能力

色譜柱上的樣品負載應(yīng)為柱介質(zhì)重量的0.1%到2%。

運行后維護

在適當(dāng)?shù)木S護下，RediSep C18色譜柱可以使用三十次或更多。反相方法應(yīng)該編寫成在分離結(jié)束時，用2-4倍柱體積（CV）的高比例（100%）有機溶劑（B溶劑）沖洗柱子。經(jīng)過2-4 CV的沖洗后，可以將有機溶劑的比例恢復(fù)到初始條件并沖洗2-3 CV，以準(zhǔn)備下一次運行的柱子平衡條件（見圖1）。或者，可以將有機溶劑的比例改為80%，以便為色譜柱存儲做準(zhǔn)備。

圖1. 運行后色譜柱沖洗

三、存儲

C18色譜柱可以長時間存儲而不會損失性能。以下是反相C18色譜柱存儲的一些通用規(guī)則：

• 一旦潤濕后，切勿讓反相色譜柱干燥。這將由于固定相的膨脹和收縮而導(dǎo)致通道效應(yīng)。如果Flash色譜系統(tǒng)上有空氣吹掃功能，應(yīng)關(guān)閉該功能。

• 將色譜柱濕潤并蓋好，存儲在含有10-30%水和70-90%有機溶劑（如乙腈、甲醇或乙醇）的環(huán)境中。

四、總結(jié)

在使用前預(yù)處理色譜柱。用高比例（100%）有機溶劑清潔色譜柱。切勿讓色譜柱干燥，并以70-90%有機溶劑濕潤和蓋好存儲。